小鼠視網膜神經節細胞 RGC-5培養小技巧    

簡介：

培養條件：1640+10%FBS+1%P/S

生長狀態：貼壁生長

不能“一放了之"。

水在低于零度的條件下會結冰。將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細胞外部的水分會首先結冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡；未結冰的溶液中電解質濃度升高，如果將細胞暴露在這樣高溶質的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質分子會受到損壞，細胞便發生滲漏，因此復溫時大量水分會進入細胞內，造成細胞死亡。

如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。如圖2所示，左圖沒有凍存保護劑，細胞內冰晶較多，右圖有凍存保護劑細胞冰晶明顯較少，原因是冷凍保護劑易與溶液中的水分子結合，從而降低冰點，減少冰晶的形成，并且通過改變未結冰溶液中電解質的濃度降低其滲透壓摩爾濃度，使細胞免受溶質損傷。1950年smith AU第一次成功利用甘油凍存了紅細胞，發現了凍存保護劑是影響凍存效果的一個關鍵因素。

前面說的都是怎樣更好地凍細胞，那么凍完的細胞如何怎樣長期保存呢？

最關鍵的是冷凍保存溫度。冷凍保存溫度是指能長期保存細胞的超低溫度，在此溫度下，細胞生化反應極其緩慢甚至停止，經過長期保存，在復蘇后仍能保持正常的結構和功能。不同的細胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果，冷凍保存溫度可以不同，但從實際和效益的觀點出發，液態氮的低溫環境(-196℃)是目前最佳的冷凍保存溫度。在-196℃時，細胞的生命活動幾乎*停止，但復蘇后細胞的結構和功能卻完好。如果冷凍過程得當，一般生物樣品在-196℃下可保存十年以上。應用-70℃~-80℃保存細胞，短期內對細胞的活性無明顯影響，但隨著凍存時間延長，細胞存活率明顯降低。

總的來說，細胞凍存是保障細胞培養的持續穩定進展的重要組成部分。標準化的大規模細胞凍存平臺技術的發展，對建立質量優異且均一穩定的生產用細胞庫更是重中之重。

小鼠肝實質細胞 AML-12

小鼠腦神經膠質母細胞 G422

小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1

小鼠乳腺癌細胞 4T1

小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標記 4T1+luc

小鼠巨噬細胞 Ana-1

小鼠胚胎瘤細胞 ATDC5

小鼠黑色素瘤細胞 B16

小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10

小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記 B16-F10+LUC

小鼠原B細胞株 BAF3

小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31

小鼠腦微血管內皮細胞株 bEnd.3

小鼠胰島素瘤胰島Beta細胞 Beta-TC-6

小鼠小膠質細胞 BV2

小鼠神經干細胞 C17.2

小鼠成肌細胞 C2C12

小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2 Clone8  

小鼠結腸癌細胞 CT26

小鼠結腸癌細胞熒光素酶標記 CT26+LUC

小鼠結腸癌細胞 CT26.WT

小鼠胚胎干細胞 E14

小鼠淋巴瘤細胞 EL-4

小鼠乳腺癌細胞 EMT6

小鼠精原細胞系 GC-1 spg

小鼠精母細胞系 GC-2 SPd(ts)

小鼠膠質細胞瘤 GL-261

小鼠膠質細胞瘤熒光素酶標記 GL-261+luc

小鼠垂體瘤細胞 GT1-1

小鼠肝癌細胞 H22

小鼠乳腺上皮細胞 HC11

小鼠肝癌細胞 HEPA1-6

小鼠肝癌細胞熒光素酶標記 HEPA1-6+LUC

小鼠心肌細胞 HL-1

小鼠海馬神經元細胞 HT-22

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8

小鼠卵巢上皮癌細胞熒光素酶標記 ID8+LUC

小鼠單核巨噬細胞 J774A.1

小鼠骨肉瘤成骨細胞 K7M2WT (K7M2-wt)

小鼠骨肉瘤成骨細胞熒光素酶標記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌細胞 LLC

小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC

小鼠淋巴瘤細胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠成纖維細胞 L929

小鼠皮下結締組織細胞 L Wnt-3A

小鼠乳腺癌高轉移細胞 MA-891

小鼠膀胱癌細胞 MB49

小鼠結腸癌細胞 MC38

小鼠結腸癌細胞熒光素酶標記 MC38+LUC

小鼠胚胎成骨細胞 MC3T3-E1

小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14

小鼠胚胎成纖維細胞 MEF

小鼠胚胎成纖維細胞 MEF(C處理)

小鼠前胃癌細胞 MFC

小鼠肺泡巨噬細胞 MH-S

小鼠胰島內皮細胞 MS1

小鼠腎足細胞 MPC-5

小鼠正常肝細胞 NCTC1469（NCTC CLONE 1469）

小鼠腦神經瘤細胞 neuro-2a

小鼠腦神經瘤細胞熒光素酶標記 neuro-2a+luc

小鼠胚胎細胞 NIH/3T3

小鼠骨髓基質細胞 OP9

小鼠雜交瘤（抗CD2）細胞 OKT11

小鼠畸胎瘤細胞 P19

小鼠淋巴樣瘤細胞 P388D1

小鼠肥大細胞瘤細胞 P815

小鼠胰腺癌細胞 panc02

小鼠胰腺癌細胞熒光素酶標記 panc02+LUC

小鼠源基于MLV-10A1逆轉錄病毒包裝細胞系 PT-67

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 RAW 264.7

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞+GFP RAW 264.7+GFP

小鼠腎癌細胞 Renca

小鼠視網膜神經節細胞 RGC-5

小鼠前列腺癌細胞 RM-1

小鼠前列腺癌細胞熒光素酶標記 RM-1+LUC

小鼠雜交瘤 SDOW-17

小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0

小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0-Ag14

小鼠腎小球系膜細胞 SV40-MES-13

小鼠肺上皮細胞 TC-1

小鼠睪丸間質細胞 TM3

正常小鼠睪丸Sertoli細胞 TM4

小鼠子宮頸癌細胞 U14

小鼠淋巴瘤細胞 YAC-1

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