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當前位置:首頁技術文章BIU87/DDP 人膀胱癌順鉑耐藥株培養說明書

BIU87/DDP 人膀胱癌順鉑耐藥株培養說明書

更新時間:2025-07-25點擊次數:283

名稱:BIU87/DDP 人膀胱癌順鉑耐藥株

耐藥濃度1000ng/ml 耐藥系數:10-12

 

BIU87 DDP細胞 .jpg


收到細胞后注意事項:

我們的運輸培養液中是不含藥物的,拿到細胞后,先放置培養箱3-6小時后,待細胞貼壁后,觀察細胞的密度判斷是否可以進行傳代,或者是需要繼續培養。若細胞可以傳代,先不加藥,按照1:2比例進行傳代,細胞保種后,可以開始加藥培養,做cck檢測IC50前需要脫藥一周。也可以細胞保種后,1瓶加藥測試耐藥濃度;1瓶不加藥,用于CCK檢測,這兩種都可以。注:需配置含藥培養基 ,不要直接忘培養瓶里面加,藥物配置要倍比梯度稀釋。

培養注意事項如下

1、需要用好點的胎牛血清培養,初次培養可以用15%血清縮短細胞適應期,穩定后再在降至10%;

2、細胞消化千萬千萬不要計時間!千萬千萬不要計時間!千萬千萬不要計時間!

3、我們消化方法:pbs清洗細胞后,加入0.7ml胰酶(不需要吸出),然后轉移至顯微鏡下觀察,每隔5-10s用力拍打瓶壁兩側(至關重要),至細胞脫落約50-70%左右后,盡快轉移至操作臺終止消化,后分瓶培養即可;

4、千萬不要放置到培養箱中計算時間消化,也不要等細胞自己收縮變圓,會導致消化過度。細胞消化過度的現象為第二天可看到很多細胞不貼壁,飄在培養基中。

如何配置含藥培養基?

利用適當的溶劑溶解藥物粉末,100mg 以內的藥物粉末最好不要再分裝,藥物粉末低不能低于10mg,分量越輕,誤差越大;配置高濃度母液后(母液不宜分裝過小,分裝體積不低于 200ul,一般 1ml),每次往下稀釋倍數控制在 100倍 內;最后一次稀釋,用wan全培養基配置,配置體積不低于 50ml,一般50ml-100ml,2-3w 內用完~

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