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去外泌體胎牛血清(Exo-FBS)
產品簡介:

去外泌體胎牛血清(Exo-FBS)
貨號:EXO-FBS-50A-1
規格:50ml
外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質的小膜泡 (30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體綿羊網織紅細胞中被發現, 1987年Johnstone將其命名為“exosome"。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶

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更新時間:2023-12-21

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產品介紹

去外泌體胎牛血清(Exo-FBS)

產品名稱:去除無外泌體血清

貨號:EXO-FBS-50A-1

品牌:SBI

規格:50ml

當外泌體在1980年被發現后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發現外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了腫瘤的生長與侵襲。

外泌體.jpg


外泌體大家應該都很熟悉。1983年,在綿羊網織紅細胞中第一次發現了現在生物學研究領域炙手可熱的“小網紅"——一種特殊囊泡結構,并與1987年正式被命名為“exosome"。

外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質的小膜泡 (30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。為細胞間通訊的重要媒介,它像一個信使,為細胞與胞外環境傳遞信息,保障機體的正常工作。

越來越多的科研人員投入到外泌體的研究中,根據PubMed統計顯示,最近幾年,外泌體研究呈爆炸增長。

外泌體的研究離不開細胞培養。以腫瘤相關外泌體研究為例,目前,收集腫瘤細胞外泌體主要有兩種方法:

方法一

使用正常培液養細胞再換無血清培液收外泌體。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培養基用于培養細胞收外泌體。

首先,就是基本的離心條件了,目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了,這兩家超離在行業內算是翹楚了。其次就是離心參數了:120000 g,4℃,離心14h,離心結果如圖:

11.jpg


1:離心后,血清外泌體會富集在管底和管壁;

2:吸取血清時,只吸取澄清部分的血清,并且遠離上圖中標記的區域;

3:吸取70-80%的澄清的血清;(注意:動作慢,動作輕)

4:其余的渾濁血清留作正常細胞的的營養物添加使用,避免浪費。

5:如果覺得純度不夠,再把離心后收集的血清做二次超速離心。

6:針對超速離心后的血清,必須進行粒徑檢測(離心前樣品和離心后樣品),該數據可以放到文章補充材料中,用來證明無血清外泌體制備成功。

WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目錄如下:

WINSERA®胎牛血清

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FBS500-WS-002

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去外泌體胎牛血清(Exo-FBS)胎牛血清(FBS)已在真核細胞培養中使用了幾十年了。然而,很少有人關注FBSRNA對培養的細胞會產生什么樣的生物學效應。來自哈佛醫學院的研究人員用RNA測序,證明了FBS含有蛋白質編碼和調控的多種RNA,包括mRNAmiRNArRNAsnoRNA等。它們中的大多數(>70%)仍然存在于細胞外囊泡(EV)和細胞間通訊研究中常使用的長時間超速離心得到的無囊泡FBSvesicle-depleted FBS, vdFBS)中。FBS相關的RNA會在分離細胞外膜泡RNAexRNA)時一同被分離出來,這會對下游RNA分析造成干擾。許多進化上保守的FBS源的RNA種類會被錯誤地認為是人或小鼠細胞的轉錄本。值得注意的是,在FBS中含量豐富的一些miRNAs,如miR-122miR-451AmiR-1246,先前已被報道為在培養細胞來源的細胞外膜泡中富含的miRNAs,這可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。對公開可用的exRNA數據庫的分析支持FBS污染的概念。此外,FBS轉錄本可被培養的細胞吸收,并影響高度敏感的基因表達譜技術的結果。因此,實驗設計過程中采取減少FBSRNA干擾的預防措施是非常有必要的。





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