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2022-819
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶(CT26+luc)細(xì)胞介紹：CT26細(xì)胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導(dǎo)得到的未分化的小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞，該細(xì)胞的一個克隆形成的細(xì)胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關(guān)抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25細(xì)胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25細(xì)胞可以表達(dá)腫瘤...
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產(chǎn)品名稱：人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞(MCF-7/Adr)細(xì)胞特性1）來源：乳腺癌2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長3）含量：1x106細(xì)胞數(shù)4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝5)用途：僅供科研使用。運輸和保存：干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。細(xì)胞接收后的處理：...
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原代細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用原代細(xì)胞培養(yǎng)越來越多地用作細(xì)胞和分子生物學(xué)的主要工具，為研究細(xì)胞的正常生理學(xué)和生物化學(xué)（例如，代謝研究、衰老、信號研究），藥物和有毒化合物的作用提供了出色的模型系統(tǒng)。細(xì)胞誘變和致癌作用。它也可用于藥物篩選以及大規(guī)模開發(fā)生物化合物（例如，疫苗、治療性蛋白質(zhì)）。3D細(xì)胞培養(yǎng)：由于原代細(xì)胞是未轉(zhuǎn)化的且不會永生化，因此它們緊密模擬了活體模型，產(chǎn)生了更具生理意義的結(jié)果，可用于模擬3D組織。這些細(xì)胞可以作為模型系統(tǒng)來研究細(xì)胞生物學(xué)和生物化學(xué)，研究細(xì)胞與致病因子（如細(xì)菌、病...
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1細(xì)胞的復(fù)蘇【概述】復(fù)蘇細(xì)胞要求快速融化的手段，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化。避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損害。【用品】培養(yǎng)液、吸管、離心管、培養(yǎng)瓶【步驟】[1]打開水浴鍋，將溫度調(diào)至37℃；[2]從液氮中取出凍存的細(xì)胞株，用鑷子夾住凍存管（戴防護(hù)面罩），迅速置入37℃的水浴鍋中，不斷振搖凍存管，使之盡快融化，要在1-2min內(nèi)完成復(fù)溫；[3]*融化后，取出凍存管，移至超凈工作臺，用75%酒精擦洗消毒，用無菌吸管吸取細(xì)胞懸液移至無菌離...
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目前，流式細(xì)胞術(shù)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)分子表達(dá)特征的分析，界定不同種類的細(xì)胞群，測定分離出的亞類純度，分析細(xì)胞的大小和總量，它可以同時分析單個細(xì)胞的多個參數(shù)。它主要用于檢測標(biāo)記在抗體上的熒光強(qiáng)度，這些熒光抗體則可以檢測與特定細(xì)胞分子結(jié)合的蛋白或配體，如與DNA結(jié)合的溴化丙啶(PI)等。染色步驟包括：將培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品制成單細(xì)胞懸液，然后將細(xì)胞放入管子或酶標(biāo)板中與熒光標(biāo)記或未標(biāo)記的抗體孵育。之后將細(xì)胞放入流式細(xì)胞儀中進(jìn)行分析。懸浮緩沖液中染色的細(xì)胞樣品通過流式細(xì)胞儀時，...
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對于流式檢測最初的一步就是選擇何種方法，通常是何種熒光物質(zhì)標(biāo)記的抗體。廠家根據(jù)需要開發(fā)了各種熒光標(biāo)記的抗體，進(jìn)行選擇時首先要滿足的就是所選擇的抗體必須在流式上能夠檢測，各單位買的流式儀功能不*一致，首先要和檢測方進(jìn)行聯(lián)系，看能否檢測。在附表里我將常用的熒光標(biāo)記物質(zhì)的激發(fā)波長和檢測波長給出，可以參考。有幾個原則一起說一下：1、流式檢測時*熒光物質(zhì)直接標(biāo)記的抗體，如果沒有直接標(biāo)記的抗體，用間接發(fā)，即二抗上標(biāo)記熒光分子同樣可以。不過這增加了處理的難度，處理步驟增多，往往會不同程度影...
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免疫熒光單標(biāo)記和雙標(biāo)記的方法1.免疫熒光單標(biāo)記方法免疫熒光單標(biāo)記是指只標(biāo)記一種蛋白質(zhì)分子，方法比較簡單，只要按照染色步驟去做，通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇，固定液選擇的合適與否，可能會直接影響染色結(jié)果。具體染色方法如下。1)所需材料與試劑(1)培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達(dá)到60％一70％的細(xì)胞。(2)一抗、FITC或TRITC標(biāo)記的二抗。(3)4％多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液(一20℃預(yù)冷20min)。(4)封閉液。(5)0．01mol／LPBS緩沖液。...
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目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法主要有以下幾種：大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因結(jié)合藥物篩選法。其中藥物濃度遞增法和大劑量藥物沖擊法成為臨床建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型的常用方法。①藥物濃度遞增法是指最初使用低濃度的藥物刺激細(xì)胞，等待細(xì)胞適應(yīng)低濃度的環(huán)境之后，再略微提高藥物濃度，繼續(xù)等待細(xì)胞適應(yīng)目前的環(huán)境，經(jīng)過反復(fù)的培養(yǎng)和加壓，最終使細(xì)胞可以在高濃度的藥物環(huán)境下生存②大劑量藥物沖擊法是在細(xì)胞培養(yǎng)時加入超高藥物濃度的藥物，但是孵育的時...
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